Parazitákból származó nanocsövek,

A vakcinák Absztrakt Jelenleg egy nagy kutatási erőfeszítés folyik a hatékony és megfizethető malária elleni vakcina megtalálásához. Azok az eszközök, amelyek lehetővé teszik a védő immunválaszok gyors értékelését, elengedhetetlenek a vakcina kifejlesztéséhez, mivel azok kiválasztási kritériumokat adhatnak a vakcina-jelöltek rangsorolásához.
Hogyan lehet eltávolítani a parazitákat a belekből
Ebben a vizsgálatban megvizsgáljuk a Sporozoita Invasion ISI vizsgálatának gátlását annak megállapítására, hogy az antitestek képesek-e gátolni a hepatociták sporozoita-fertőzését. A P rágcsáló parazita sporozoitát expresszáló GFP alkalmazásával. A nemrégiben előállított transzgenikus P-vel együtt. A P-t expresszáló kiméra rágcsálóparaziták kombinálásával. A falciparum antigének és a fertőzés áramlási citometriás mérése alapján képesek vagyunk robusztusan értékelni a vakcina által kiváltott antitesteket, az egerekből, a rhesus makákókból és az emberi klinikai vizsgálatokból, hogy funkcionálisan képesek legyenek blokkolni a hepatociták sporozoita invázióját.
A falciparum malária-fertőzések az elmúlt 15 évben több malária intervenciós stratégia 1 szélesebb körű alkalmazása miatt továbbra is jelentős halálozást és morbiditást okoznak. A WHO becslése szerint ben félmillió malária okozta haláleset történt, a szubszaharai Afrika többségében 5 év alatti gyermekeknél 2. A maláriaellenes gyógyszerek ellenállásának fokozódó jelentése kiemeli a malária elleni vakcina létfontosságú szerepét. Az emberben a maláriafertőzés egy fertőzött szúnyogcsípéssel kezdődik, amely P-t injektál.
A szporozoiták ezután a májba vándorolnak, ahol megfertőzik a hepatocitákat, és asszexuális replikáción mennek keresztül, majd a merozoiták kialakulását és felszabadulását körülbelül 6—7 nappal később a véráramba vezetik, ami megfertőzi és újra fertőzi a parazitákból származó nanocsövek.
Jelentős klinikai előrehaladást végeztek két különböző eritrocitás fázisú rekombináns vakcinával szemben két különböző P-vel szemben. Azonban a parazitákból származó nanocsövek vér-stádiumával szembeni vakcinák funkcionális értékelésére használható növekedési gátlási vizsgálattal GIA ellentétben jelenleg nincsenek szabványosított gyors szűrővizsgálatok az antitestek sporozoiták által a hepatociták behatolását gátló képességének mérésére.
Az ilyen vizsgálatok hiányoznak, részben a P korlátozott hozzáférése miatt. Az első vizsgálat a sporozoita invázió megakadályozására szolgáló antitestek kapacitásának mérésére humán embrionális tüdő sejtvonalat és Giemsa vagy immunfluoreszcens 10 -es sejten belüli paraziták festését használta. Ebből következően számos különböző csoport hepatocita sejtvonalakat használt a P elleni antitestek kapacitásának meghatározására. Míg a 13, 14, 15 és Parazitákból származó nanocsövek 16 jelölt antitesteket korábban a sporozoita invázió kvantitatív kimutatásaként alkalmazták, ezek a módszerek munkaigényesek és költségesek.
A transzgenikus parazita technológia fejlődésével most már kiméra P előállítása is lehetséges. Ezen kívül számos P. Az áramlási citometriával kimutatható fluoreszcens markert expresszáló berghei paraziták már rendelkezésre állnak.
Transzgenikus P alkalmazásával. Ebben a jelenlegi vizsgálatban kifejlesztettünk egy sporozoita invázió ISI új gátlását az áramlási citometriás mérés alapján, hogy meghatározzuk az immunizálás által indukált antitestek képességét a hepatociták sporozoita-fertőzésének gátlására. Kiméra P alkalmazásával. A kiméra parazita technológia és az áramlási citometria előrehaladásának kombinálásával közepes és nagy teljesítményű funkcionális vizsgálatot hoztunk létre, amely in vitro a sporozoita antigéneket célzó antitestek immunizálási hatékonyságának kimutatására használható, és számos pinworms kezelés fokhagymával P tesztelésére alkalmas.
Eredmények A hepatocita és a sporozoita sejtek számának optimalizálása az ISI vizsgálathoz Az alábbiakban leírt vizsgálatokhoz két transzgenikus P. A kiméra P. A falciparum parazitákból származó nanocsövek lásd alább szintén expresszálják a GFP-luciferáz fúziós fehérjét az eef1α promoter szabályozása alatt.
Mivel a különböző hepatocita sejtvonalak eltérő P-vel szembeni engedéllyel rendelkeznek. A lemezeket egy éjszakán át inkubáltuk a sejtek betakarítása előtt és a mintákat az áramlási citométeren vettük fel. A HepG2-et egy lyukonként a fertőzött sejtek nagyobb százalékos arányához vezetett, mint az sejtek kutyái 1a. Ábraés ez megegyezett minden hozzáadott sporozoit esetében. Fontos, hogy a fertőzött sejtek ugyanazt a százalékát elérjük, amikor összehasonlítottuk a sporozoiták és a hepatociták arányát; sporozoit és sejt 1: 1, 6 sporozoita: sejt arány hasonló szintű fertőzőképességet adott, mint sejt, amely sporozoitával fertőzött 1: 1, 5 sporozoita: sejt arány.
A nagyobb számú sporozoiták hozzáadása a fertőzött sejtek százalékos arányának növekedéséhez vezetett 1b. Ábra mindhárom vizsgált sejtvonal esetében. A Huh7 sejtek a legnagyobb P- toleranciát mutatták. Mivel minden sejtvonal előnyös sejtnövekedési közeggel rendelkezik, amely befolyásolhatja a sporozoita fertőzőképességét, összehasonlítottuk a sejtvonalak és a táptalajok különböző kombinációit az optimális tenyésztési körülmények azonosítása céljából.
Bár a különböző táptalajokban a tenyésztő sejtek csak kis hatást gyakoroltak a fertőzött sejtek százalékára, a legnagyobb fertőzőképességet teljes RPMI tápközeggel figyeltük meg S1a ábraezért az összes további kísérletben RPMI-t használtunk.
A tenyésztési körülmények optimalizálása a fertőzés P kimutatására. A sejteket a következő napon gyűjtöttük össze, és parazitákból származó nanocsövek fertőzött sejtek százalékos parazitákból származó nanocsövek áramlási citometriával határoztuk meg.
Teljes méretű kép Mivel a sporozoita fertőzőképesség leolvasása az intracelluláris parazitákból származó GFP expressziójára és az áramlási citometriával történő GFP-jel kimutatására támaszkodik, fontos volt a sporozoiták hozzáadását követő optimális idő parazitákból származó nanocsövek a sejtek betakarítására és a mintavételezésre az áramlási citométeren.
A Pb GFP sporozoitákkal fertőzött sejtek áramlási citometriával detektálhatók már a fertőzés utáni 4 órában hpi 1c. Ábraamely a fertőzés után 16 órával esett vissza, tükrözve a transzverzális vagy abortált inváziós események nagy számát. A fertőzött sejtek százalékos aránya a fertőzés utáni 16 órától tovább lassan csökken, valószínűleg a nem fertőzött Parazitákból származó nanocsövek sejtek replikációjából Bliss és mtsai.
Bár a fertőzött sejtek aránya az idővel csökkent, a GFP jel átlagos fluoreszcens intenzitása MFI nőtt, összhangban a 20 hepatocita exoeritrocita parazita formák növekedésével.
- Apoptotikus markerek protozoon parazitákban
- Sűrített szén nanocsövek: új, többfunkciós szén allotropok családja Parazitákból származó nanocsövek Képalkotó technikák és anyagok Absztrakt Bemutatjuk a vízben oldódó szén nanorészecskék CNP-ka grafitos burkolattal ellátott szén nanokubulák CNC-ka kámfor Cinnamomum camphora használatával készült szén-pontok CD-k parazitákból származó nanocsövek előállítására szolgáló zöld módszert.
- A genitális szemölcsök megnövekedtek
- Parazitákból származó nanocsövek - szeddviddvedd.hu
- Parazitákból származó nanocsövek. Tudomány és Innováció
- Podlupszki Csaba Gasztroenterológus Paraziták Horogféreg Ancylostoma duodenale Az emberi horogféreg két nematóda hengeresféreg fajtára osztható, az Ancylostoma duodenale és a Necator americanus.
Anti- P. A berghei CSP monoklonális antitest gátolja a hepatociták sporozoita invázióját dózisfüggő módon az ISI vizsgálatban A sporozoita invázió ellenanyag által közvetített gátlásának kimutatásához szükséges tenyésztési és inkubációs periódusok optimalizálása céljából a kezdeti kísérleteket monoklonális ellenanyaggal mAb végeztük P ellen.
Az első kísérletben azt akartuk meghatározni, hogy a sporozoiták mAb- Pb CSP-vel történő előre inkubálása különböző időszakokra hatással lenne-e a sporozoita invázióra. Ábra balravagy ha a gátlás százalékos aránya a sporozoitahoz képest csak a lyukak 2a.
Ábra jobbra.
Parazitákból származó nanocsövek,
A sporozoita invázió ellenanyag által közvetített gátlásának kimutatásának optimalizálása. Az adatokat kétirányú ANOVA-val elemeztük, amely az antitest koncentrációjának szignifikáns hatását mutatja, de nem mutatott szignifikáns hatást a sporozoid számra. A gátlási adatok százalékos arányát kétirányú ANOVA-val elemeztük az ellenanyag-koncentráció időbeli hatásának vizsgálatára, az idő jelentős hatása nem volt megfigyelhető. Teljes méretű kép A sporozoiták fertőzőképessége nagyon érzékeny a hőmérséklet változásokra.
Ezért meghatároztuk, hogy a sejtek 19—21 o C-on tartják-e a P optimális hőmérsékletét.
Mint eltávolítani az összes parazitát
Fontosnak tartottuk, hogy az első tenyésztési óra inkubációs hőmérséklete, legyen az 21 ° C vagy 37 ° C, úgy tűnik, nem befolyásolja sem a sejtek fertőzőképességét parazitákból származó nanocsövek.
Ábrasem az mAb képességét. A megfigyelt fertőzött sejtek százaléka megduplázódott, ha mal fertőzött, szemben a sporozoitával 2c. Ábra balraés hasonló gyógyszer-gátlási görbéket kaptunk és sporozoit-fertőzéssel. A sporozoita számok csökkentése nem változtatta meg a dózisválasz görbét, ami azt jelzi, hogy kevesebb üregenként sporozoit használhatunk a vizsgálati érzékenység csökkentése nélkül.
Ez azt is sugallja, hogy a sporozoita fertőzőképességének ingadozása vagy a sporozoita-számmal kapcsolatos hiba nem befolyásolhatja az ISI-értéket, amennyiben a fertőzőképességi adatokat minden kísérletben elemezzük a sporozoita fertőzőképességére a kontroll kutakban. Fontos, hogy hasonló gátlási görbéket figyeltünk meg, amikor vagy sporozoitát adtunk hozzá, bár a gátlás százalékos aránya valamivel magasabb volt, amikor sporozoitot adtak hozzá bár nem statisztikailag szignifikánsami az antitest potenciális korlátozó hatására utal, ha több sporozoitot adagolunk egy lyukanként.
Bár a fertőzött sejtek százalékos aránya idővel csökkent a 2d. Ezen túlmenően a GFP-jel szintje nem volt szignifikáns különbség a csoportok között bármikor 2d. Ábra jobbraösszhangban a monoklonális antitesttel, amely csak a sporozoitáknak a hepatocitákba való behatolásának képességét gátolta, és nem befolyásolja a későbbi hepatocitákon belüli növekedését.
Míg a leolvasási idő fontos a GFP-jel áramlási citometriával történő detektálásának képessége szempontjából 1. Azonban a sporozoita fertőzőképesség inter kísérletváltozása miatt, amely a megfigyelt gátlás százalékos változásához vezethet 2a. Ábraa csoportok közötti összehasonlítást csak egyetlen kísérletben szabad elvégezni.
Az antigénspecifikus gátlás meghatározásához szükséges optimális körülmények mellett a szérumkoncentráció és a hőaktiválás hatását is vizsgáltuk a sporozoita invázió gátlására.
Ezekben a kísérletekben naiv egérből gyűjtött szérumot használtunk. A szérumkoncentráció növelése a fertőzött sejtek számának csökkenését eredményezte S1b ábra balraés ezáltal megnövekedett gátlási arányt S1b ábra.
Úgy tűnt, hogy a hőinaktiválás növeli a sporozoita invázió gátlását bár nem statisztikailag szignifikánsanbár nem valószínű, hogy ez az antitest által közvetített gátlás, mivel az mAb- Pb CSP hőaktiválása megszüntette sporozoita gátló hatását S1b ábra jobbra. A növekvő szérumkoncentrációval megfigyelt sporozoita-invázió megnövekedett gátlása valószínűleg a szérum és a tenyésztési hőmérséklet szerepéből adódik, a sporozoiták exo-eritrocitás formákká való átalakulásának 23 indukálására, ezáltal csökkentve a sporozoid fertőzőképességét.
- Hpv szuppresszív terápia
- Parazitákból származó nanocsövek Why Blue Whales Don't Get Cancer - Peto's Paradox unalmas számok a paraziták számára Papillómák csomók hosszú intersticiális féreg, gyomorrák örökletes milyen színű férgek.
- Ahol a szemölcsöket eltávolítják Surgitron-nal
- Parazitákból származó nanocsövek Szegedi Tudományegyetem | Tudomány és Innováció
- Van-e gyógyszertárakban parazitákból származó 7-es tinktúra?
- Szegedi Tudományegyetem Tudomány és Innováció Parazitákból származó nanocsövek, Elmélet és számítás Absztrakt Az új funkcionális szén-polimorfok feltárása a tudományos vizsgálatok tartós témája.
Tekintettel a sporozoita invázió megnövekedett gátlására vagy a csökkent sporozoita fertőzőképességre, melyet a szérumkoncentráció növekedésével és a kísérletek között fellépő variabilitással figyeltek meg, fontos, hogy minden kísérletben a vakcinázás előtti vagy naiv szérummal rendelkezzünk, hogy a gátlás antigénspecifikus legyen. Ezekhez a kísérletekhez kiméra P-t használtunk. A kiméra vonal szporozoitjai csak P-t fejeznek parazitákból származó nanocsövek.
Annak ellenére, hogy az anti- Pb CSP 3D11 monoklonális antitest gátolja az inváziót S2b ábrameglepetésünkre a Pf CSP-specifikus monoklonális antitest 2A10 növekvő koncentrációja nem tudta gátolni az inváziót, amikor a paraziták a CSP fehérje mindkét példányát expresszálták, és csak a Pb CSP specifikus mAb 3D11 jelenlétében volt jelen, amikor gátlást figyeltünk meg 3a.
Ha a Pf CSP vakcinázott egerekből származó szérummintákat használtuk az egyes parazitavonalakon megfigyelt gátlás összehasonlítására, bár mindkét parazita sorral bizonyos mértékű gátlást figyeltünk meg, a naiv minták fölötti szignifikáns gátlás sokkal nyilvánvalóbb volt a Pf Pb CSP-vel.
Figyelembe véve a CSP kritikus szerepét a sejt invázióban, feltételeztük, hogy a magas anti- Pf CSP antitestek körülményei között a paraziták visszatérhetnek a hepatociták inváziójához a Pb CSP-en keresztül, és ez lehet antitest dózisfüggő.
A sejteket órával később összegyűjtöttük, és a fertőzött sejtek százalékos arányát áramlási citometriával határoztuk meg. A grafikonok a gátlás százalékos arányát képviselik a sporozoita-hoz viszonyítva, parazitákból származó nanocsövek a kontroll-lyukakra vonatkoztatva, minden egyes replikációnál kiszámítva az egyes dózisokban. A szürke sávok azt a gátlási százalékot jelölik, amelyet a vizsgálat során a naiv szérum mintákkal figyeltek meg. Teljes méretű kép Annak megállapítására, hogy a különböző parazitatörzseknél megfigyelt gátlási különbségek az antitest-titerhez kapcsolódtak, a különböző rekombináns vakcina vírusvektor vs VLP vagy vírusvektoros vakcina-dózis miatt antitest-titereket mutató szérummintákat teszteltünk mindkettővel szemben.
Ezzel ellentétben a helyettesítő Pf Pb CSP paraziták magas szintű gátlását azonos szérum mintákkal figyelték meg, még alacsony szérumhígítások esetén is 4a.
Malachov parazitakezelési receptek Módszerek a férgek ellen Parazitaellenes program: tinktúra Germixil Magyarország.
Ábra balraés pozitív korrelációt figyeltek meg az ellenanyag-titer és a gátlás között, amikor a szubsztitúció helyett Pf Pb CSP parazitákat használtunk a vizsgálatban 4a. Ezzel szemben negatív korrelációt figyeltünk meg a százalékos gátlás és parazitákból származó nanocsövek antitest-titer között, amikor a Pf Pb UIS4 addíciós parazitákat használtuk a vizsgálatban 4b. A hatás nem volt kísérletfüggő, mivel szignifikáns korrelációt figyeltünk meg, amikor csak egy kis számú mintát teszteltünk egy kísérletben S3a ábra jobbra.
CSP paraziták S3b ábra. Ezenkívül más P- vel oltott egerekből származó szérum. Minden egyes kísérletben a szürke sávok a naiv szérum mintákkal megfigyelt gátlási szintet jelzik. CSP töltött kör10 8 iu ChAd Ábra és pozitív tendenciával bár parazitákból származó nanocsövek statisztikailag szignifikáns figyelték meg a magasabb anti- Pf CSP antitestekkel szembeni gátlás növekedése is megfigyelhető 4c. Ábra balraés szignifikáns korrelációt figyeltünk meg az anti- Pf CSP antitestek szintje és a gátlás között 4d.
Annak meghatározására, hogy az ISI-vizsgálatban a gátlást egy további P- vel vizsgálták-e az egyes fajokon.
Van-e gyógyszertárakban parazitákból származó 7-es tinktúra?
Fontos, szemölcsök és immunogram a P- vel oltott egerekből származó szérum. Úgy tűnik, hogy a szérum sporozoita-invázió blokkolására való képessége nem kapcsolódik az egerek vagy vakcinabetét ME-TRAP vs TRAP törzséhez, hanem a vakcinázással indukált antitestek szintje, mint az antitest ELISA titere és a százalékos gátlás közötti szignifikáns korreláció megfigyelték 5a.
A Huh7 sejteket Pf [e-mail védett] Pb UIS4 sporozoitákkal fertőztük meg, növekvő szérumkoncentrációval keverve a sejtek betakarítása előtt, hogy meghatározzuk parazitákból származó nanocsövek P-t. Az adatokat nem-parametrikus Spearmans korrelációs teszt segítségével elemeztük, de nem volt szignifikáns korreláció. ELISA-val jobbranem paraméteres Spearman-teszt segítségével elemezve, de szignifikáns korreláció nem volt megfigyelhető.
Teljes méretű kép Az egér szérummintáit kiméra P-vel szemben is teszteltük. A vonal szporozoitjai csak P-t fejeznek ki. Ezenkívül az ebben a vizsgálatban megfigyelt gátlás százalékos aránya korrelált a Pf TRAP antitestek szintjével 5b. A vakcinázás előtti mintáknál megfigyelt magas gátlási szint azonban megnehezítette a vakcinázás egyértelmű hatásának megfigyelését a makákó 5c. Ábra vagy az emberi 5d. Ábra szérummintákkal. Ábra balraés nem volt szignifikáns korreláció a Pf között. A TRAP antitestek szintje és a gátlás százalékos aránya 5c.
A makákók és az emberek szérumának alacsony szintű gátlása és magas háttere miatt nem vizsgáltuk a mintákat a Pf [email védett] Pb TRAP sporozoitákkal szemben. Tekintettel a Pf TRAP-vel szemben megfigyelt antitestek alacsony titereire, az antitest-titereket egy küszöbérték fölötti értékre utalna, hogy az antigénspecifikus hatást az ISI vizsgálatban megfigyelhessük. Vita A P ellenanyag által közvetített gátlásának sokoldalú, robusztus és viszonylag nagy teljesítményű in vitro funkcionális értékelése.
Ebben a tanulmányban a transzgenikus P-ben történt közelmúltbeli előrelépéseket alkalmaztuk. Miután azonosítottuk az optimális sejtvonalakat, a tenyésztési körülményeket és az áramlási időpontokat, az ISI vizsgálatot alkalmaztuk az ellenanyagok P- gátló hatásának tesztelésére. Ebben a tanulmányban két kiméra parazitát használtunk; az egyik, amelyben az endogén csp gént helyettesítettük a P-vel. A másik sorban van a P.