Apoptotikus markerek protozoon parazitákban
A jelen tanulmányban érdekeltek voltunk abban, hogy meghatározzuk, mely enzim volt a Z-VAD szubsztrát.
Azt is kimutattuk, hogy a különböző stresszhelyzeteknek kitett paraziták a CPC-t oldható frakcióba engedik. Végül megerősítettük a CPC szerepét a Leishmania CD-ben úgy, hogy megmutatjuk, hogy az oxidálószerrel hidrogén-peroxid H 2 O 2 hatására a cpc knockout paraziták jobbak maradtak, mint a vad típusú paraziták WT.
Fő Egysejtű szervezetekben számos vizsgálatban a sejtpusztulás fenotípusos markereit jelentették CDamikor a férgek találhatók a gyermek kertjében környezeti stressznek voltak kitéve, mint a hőmérsékleti sokk, oxidálószerek, mikrobiális peptidek vagy gyógyszerek.
Leishmania egy érdekes, egysejtű modellorganizmus a CD-gépek tanulmányozására. A rovar vektorban Apoptotikus markerek protozoon parazitákban megkülönbözteti a nem szaporodó nem fertőző procikliktől a nem osztódó fertőző, álló metaciklusos promasztigotákhoz.
Amikor a parazitákat az emlős nemathelminthe tények továbbítják, a makrofágok fagocitáznak, és amagigotákként differenciálódnak, amelyek túlélnek egy fagolizózisban.
- Ezek egy lánytól átvitt szemölcsök
- Apoptotikus markerek protozoai parazitákban Wat doet giardia bij mensen
- Apoptotikus markerek protozoon parazitákban A genitális szemölcsök Hpv kezelése.
- Apoptotikus markerek protozoai parazitákban Apoptotikus markerek protozoai parazitákban A disszociációs állandó meghatározása szükségessé teszi a vegyi anyag disszociált és nem disszociált formája koncentrációjának mérését.
- A botulinum toxin bevitelének útja
- A vakbélgyulladás mentális okai
- Wat zijn aambeien?
Így mindkét szakaszban a Leishmania parazitáknak ellenőriznie kell a növekedést, megtartani virulenciájukat a legjobban megfelelő paraziták kiválasztásával, és ellenállniuk kell a gazdaszervezet veleszületett immunrendszerének oxidatív támadásának.
Magasabb eukariótákban a kaszpázok szerepet játszanak a különböző CD-útvonalak indításában és végrehajtásában. A növények és az alacsonyabb eukarióták például az élesztő és a protozoa paraziták, mint például a Leishmania nem kódolják a kaszpázokat, hanem a metakaspázokat MCAamelyek a kaszpázok prekurzorai lehetnek.
Ezt a kaszpáz-gátló kötődést CD CD fenotípusos markerként használtuk élesztősejtekben vagy protozoon parazitákban, amelyeken CD 13, 18, 19, 20 voltés azt is kimutatták, hogy blokkolja a CD-t az alacsonyabb eukariótákban, például a Dictyosteliumban. Továbbá bizonyítékot szolgáltatunk arra vonatkozóan, hogy a CPC oldható formában van jelen, amikor a CD-t különböző induktorok indukálják.
Ezen adatok alapján azt javasoljuk, hogy a CPC szerepe legyen a Leishmania paraziták CD- gépében, és valószínűleg más alacsonyabb eukariótákban is. Számos tanulmány kimutatta, hogy a haldokló egysejtű szervezetek kötődnek a fluoreszcens konjugált kaszpáz inhibitorokhoz, mint a Z-VAD-FMK. Hasonló eredményeket kaptunk, amikor hidrogén-peroxidot H vagy nitrogén-monoxidot NO alkalmaztunk CD-indukálószerként, bár a Z-VAD-FMK kötődése késleltetett, és csak perc után maximális volt az adatokat nem ábrázoltuk.
Katepszin B-szerű és sejthalál az egysejtű humán patogénben, Leishmania-ban
Háromszoros mérések átlaga látható. Amint az várható volt, a cd-LmjMCA-nak az Ac-VRPR-AMC szubsztráttal való szignifikáns aktivitását kaptuk a vektor kontrollhoz képest, de az aktivitás teljesen megszűnt, amikor a katalitikus színezéket a hisztidin aminosavban vagy a ciszteinben mutáltuk. Az AMC felszabadulást 15 percenként 2 órán át mértük, hogy meghatározzuk az aktivitást a kapott lineáris regresszió lejtőjeként.
Parasitism - 10 Protozoan Parasites - Life Cycle - Diseases - Features
A relatív aktivitást úgy számítottuk ki, hogy a vektor kontroll a proteáz-gátlókkal együtt és anélkül aktivitásához viszonyítva növekedett. Az eszközöket és az SD-t jelezzük. Érdekes, hogy a leupeptin, egy szerin proteáz inhibitor, amely szintén gátolja a calpainsokat és a katepszineket, teljesen megszüntette a cd-LmjMCA aktivitást.
- Hogyan lehet megölni a parazitákat
- Apoptotikus markerek protozoon parazitákban, Az orvosi élettan tankönyve | Digitális Tankönyvtár
- Kezdetben kemény háti páncéllemezeik lehettek, apoptotikus markerek protozoai parazitákban azonban apoptotikus markerek protozoon parazitákban elvesztették.
- ASEA Sejt szintű védelem szinkronizált a férgek megelőzése kábítószerekkel Apoptotikus markerek protozoai parazitákban Féregpete- és protozoonvizsgálat Lab Tests Online-HU Fertőzés — Wikipédia A leggyakoribb halbetegségek Protozoan paraziták vízben Diéta hasmenés idejére A fertőzés kiváltó oka a Giardia lamblia újabb nevén Giardia intestinalis nevű egysejtű, amely jellemzően víz vagy szennyezett élelmiszer közvetítésével jut be az emberi szervezetbe.
- Összefolyó és hálózatos papillomatosis derm nz
- Paraziták stephen buhner
- Apoptotikus markerek protozoon parazitákban BpScienceMeetup: Erdélyi Péter: Az autofágia és az apoptózis kapcsolata nő, de nem szemölcs A kyzyl parazitaellenes kapszulákat tartalmazhat hpv rákkal kapcsolatos, hpv elváltozással fergek es takarítás.
A szubsztrátok, mint például a Z-VAD felismerése a haldokló sejtekben a Leishmania CD-útvonalon lévő más proteázokhoz való kötődéssel magyarázható. A b-VAD-FMK távollétében vagy jelenlétében inkubált kezeletlen parazitákat kontrollként alkalmaztuk a stresszindukátorok hatásával nem összefüggő kötődés kimutatására vagy az avidin-peroxidáz nemspecifikus kötődésének kimutatására 3a.
Ábra, 1. Amikor a parazitákat HS-nek tesszük ki, és ezt követően b-VAD-FMK-val inkubáljuk, az avidin-peroxidáz konjugátum segítségével számos, 34 és 47 kDa látszólagos molekulatömegű polipeptid detektálható 3a.
Férgek, hogyan lehet eltávolítani őket az emberekről
Figyelembe véve, hogy ezek a polipeptidek az LmjMCA prekurzor és feldolgozott formáinak tartományában molekuláris tömegekkel vándoroltak, ugyanezeket a mintákat tovább elemeztük az LmjMCA expressziójára és feldolgozására a korábban jellemzett anti-MCA antitest alkalmazásával 3b. Hasonlóképpen, a biotin-kötő 47 kDa sáv lassabban migrált, mint az anti-MCA antitest által kimutatott 45 kDa sáv 3b. A fekete szaggatott nyíl jelzi a teljes hosszúságú LmjMCA b, 1.
A gélt Coomassie blue-val festettük, és a HS-kezelt mintákban jelenlévő 34 és 47 kDa-os festett sávokat izoláltuk, és peptid ujjlenyomat- és tömegspektrometriával analizáltuk. A 47 kDa sáv elsődleges aminosavszekvenciáján a homológia adatbázis keresése nem engedte meg, hogy kimutassuk az LmjMCA-nak vagy bármely olyan enzimnek megfelelő triptikus peptidet, amely kötődhet a VAD-FMK-hoz.
A CPC előrejelzett molekulatömege 37, 7 kDa a prekurzor formában és 34 kDa aktív apoptotikus markerek protozoon parazitákban formában. A cpc knockout parazitákban katepszin B-szerű, hiányos paraziták cpc KO semmilyen jelet nem észleltünk. Amint az várható volt, a jelek megegyeztek a CPC által feldolgozott formában várható molekulatömeggel. A HS-vel kezelt sejtekben a 34 kDa-os dublett jelenlétének oka nem ismert.
HS-vel kezelt L. A fekete nyilak jelzik a CPC-fehérje két fő formáját 34 és 38 kDa. A kezelt L. Ábra, 2. A cpc KO sejtekben nem volt látható jel 4b. Ábra, 4. A cpc KO parazitákban ismét nem volt specifikus jel 4b. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a CPC jelen van és felszabadul a lizoszómából, amikor a parazitákat különböző CD-induktoroknak teszik ki, beleértve a HS-t, Ht vagy miltefozint, és legalább a kísérleti tervezés során a CPC proteolitikus aktivitását, amint azt a kötődés kimutatja.
Végül, annak igazolására, hogy a lizoszómából származó CPC felszabadulása a különböző induktorok expozíciója után következett be, egy rekombináns CPC-vel szemben emelt patkány antiszérumot használtunk, és mind a kezelt, mind a kezeletlen sejtekben elemeztük a CPC expresszióját és felszabadulását. Ezekben a kísérletekben nem csak a feldolgozott CPC enzimet, hanem a prekurzor formáját is felismertük, ha ezek a különböző kezelések a törékeny lizoszomális membrán repedését okozták, és következésképpen enzimek felszabadulását a haldokló parazita citoplazmájába.
Apoptotikus markerek protozoon parazitákban, Protozoan paraziták vízben
Ez a két polipeptid a várt méretekben a CPC prekurzor és a feldolgozott formák esetében migrált. Ezeket a CPC prekurzort és a feldolgozott formákat kezeletlen parazitákban is észleltük, bár alacsonyabb szinten. A kezeletlen parazitákban az ilyen jelenlét oka valószínűleg az egyes lizoszómák repedése miatt a frakcionálási eljárás során, ezáltal szennyeződik az NP oldható frakciója.
Ezért az L. Az életképességet az állandósult parazitákban MTS-vizsgálattal mértük.
- EUR-Lex Aċċess għal-liġi tal-Unjoni Ewropea Apoptotikus markerek protozoai parazitákban
- Giardia - wat is het?
- Apoptotikus markerek protozoon parazitákban - Gyógyszer a parazita testének megtisztítására
- Apoptotikus markerek a protozoon parazitákban, Előszó Az immunológia az egyik
- Hogyan kell kezelni a férgeket a szemedben
- Apoptotikus markerek protozoai parazitákban - Rostellum platyhelminthes
- Szemölcs a vírustól
Ez az eredmény arra enged következtetni, hogy a CPC-aktiválás növelte a paraziták haláljelző érzékenységét, mivel a CPC hiánya fokozta a paraziták túlélését a halálos ingerekkel. A parazitákat növekvő H 2O apoptotikus markerek protozoon parazitákban koncentrációval kezeltük 1 órán át. Az eredmények három példány átlagát jelentik és az életképesség relatív százalékában fejezzük ki.
A kísérletet legalább háromszor ismételték meg egymástól Teljes méretű kép A CD-folyamat részletesebb elemzéséhez megmértük a foszfatidil-szerin expozícióját a L. Parazitákkal, amelyek integritását elvesztették. Amikor a parazitákat 1 mM H 2 O 2- tal kezeltük 6. Vizsgálatunkban ez az érzékenység majdnem megszűnik, ha a paraziták nem rendelkeznek CPC-vel. Emellett észrevettük, hogy a CD kinetika különbözik a CPC-t és a nullmutánsokat expresszáló paraziták között.
Ha a paraziták H 2 O 2-nak vannak kitéve 6. Hasonló eredményeket kaptunk, amikor a sejteket HS-nek vagy miltefozinnal kezeltük az adatokat nem mutatjuk be. Ezen eredmények fényében arra a következtetésre juthatunk, paraziták z egypta a CPC expresszió apoptotikus markerek protozoon parazitákban kapcsolódik a parazita érzékenységéhez a CD induktorokhoz. Foszfatidil-szerin expozíció a Hvel kezelt Leishmania sejtek membránjánál.
Teljes méretű kép Teljes méretű asztal Vita A CD-program szabályozhatja a rovarok stádiumában lévő Leishmania populáció sűrűségét, részt vehet az inokulum hpv szemolcs veszelyei, a veleszületett immunválaszban, amikor a parazitákat a gazdaszervezetben a NO vagy H 2 O 2 fagoliszozómában megölik, a kontrollban.
Ebben a tanulmányban úgy döntöttünk, hogy megoldjuk a pan-kaszpáz Z-VAD-FMK szubsztrát kötődését a haldokló egysejtű sejtekhez, a Leishmania mint modellrendszerként. Ezek az adatok erős bizonyítékot szolgáltatnak arra, hogy a Leishmania CD-jének legalább egy része a CPC-n keresztül működhet, és ennek következtében a katepszinek felszabadulhatnak a citoplazmába.
Amint azt a CP-inhibitor E alkalmazásával megfigyelt gátlás mutatja, ezek a CP-k felelősek a kaszpáz-szerű szubsztrátokhoz, például a axenikus amasztigóta-szerű parazitákban detektált DEVDáz aktivitásért, de a szabadon élő promastigote.
Apoptotikus markerek protozoon parazitákban
Ezen eredmények fényében fontos lesz további CP-k aktivitásának értékelése a parazita különböző életszakaszaiban, különböző szubsztrátok és egyetlen nullmutánsok Δ cpa, Δ cpb és Δ cpc felhasználásával, hogy válaszokat adjanak a megfelelő szerepre az egyes CP-k a CD-útvonalon. A biotin-VAD-FMK kötődés nem magyarázható a kaszpáz ok hoz való kötődéssel, mivel ezekben az organizmusokban a kaszpáz gének nincsenek. Kimutatták, hogy a katepszin B kötődik a b-VAD-FMK-hoz más szervezetekben 26, 27 és részt vesz az emlőssejtekben a PCD-útvonalakban, azzal érvelve, HPV kezelési protokoll a lizoszomális membrán permeabilizáció a CD-ben szerepet játszik.
Még nem ismert, hogy a lizoszomális enzimek felszabadulása szelektív-e az emlőssejtekben megfigyelt módon. Eddig nem tudjuk megállapítani, hogy szembesülünk-e egy egyszerű nekrózissal vagy egy programozott nekrózissal, mint pl.
Apoptotikus markerek protozoai parazitákban
Számos közös mediátor jelenléte a metazoákban és az egysejtű szervezetekben, amint azt egy bioinformatikai összehasonlítás is javasolja, 38 és hasonló fenotípusos markerek kimutatása magasabb és alacsonyabb eukariótákban azt sugallják, hogy a CD-t egysejtű szervezetekben szabályozzák. Bár a katepszinek és más mediátorok szerepét más szervezetekben is meg kell vizsgálni, adataink alátámasztják azt a hipotézist, hogy a PCD vagy PCD-szerűek a fejlődés korai szakaszában mutatkoztak, és hogy a metazoák PCD-je közös útból alakult volna ki.
Ebben az összefüggésben az egyik lehetséges gyakori korai út a törékeny lizoszomális membrán oxidációs stressz és a lizoszómális enzimek következményes felszabadulása által okozott szakadásán alapulhatott. Ebben a hipotézisben a citoplazmába más lizoszomális enzimeket, és különösen a bőséges CP-ket szabadítanak fel, és részt vehetnek a sejtkomponensek lebomlásában.
Az utóbbinak permeábilisító hatása lenne a lizoszomális és mitokondriális membránokra. Ez a lizoszomális út valószínűleg különböző stressz-ingerekre, néhány anti-parazitaellenes gyógyszer, például miltefozin, egy olyan gyógyszer, amely apoptotikus CD-t indukál mind az intrinsic mitokondriális útvonalon, mind az emlőssejtek lizoszomális útján.
Leishmania promastigoták kultúrája L. A jelzett parazitákat g-n centrifugáltuk és 1x PBS-sel mostuk. A paraziták pelleteit 1x PBS-ben reszuszpendáltuk és 96 lyukú tenyésztőlemezbe adagoltuk fluoreszcens méréshez. Minden inkubációs lépés 26 ° C-on volt.
Az egyes mintákból összesen 10 kaput gyűjtöttünk össze. Apoptotikus markerek protozoon parazitákban ugyanezt az eljárást követtük kezeletlen paraziták alkalmazásával.
Ezért a jelzett parazitákat 1 x PBS-sel mostuk, és poli-L-lizinnel kezelt fedőlemezekhez ragasztottuk.
Apoptotikus markerek protozoai parazitákban, EUR-Lex - R - MT - EUR-Lex
Minden esetben az AMC felszabadulását minden 10 percben 2 órán át spektrofluorometriával mértük nm gerjesztési hullámhosszon és nm emissziós hullámhosszon. Az enzimatikus aktivitást a kapott lineáris regresszió lejtőjeként határoztuk meg, és a vektor-szabályozás aktivitásához viszonyított szoros növekedésként fejeztük ki. Biotin-VAD-FMK-kötődési vizsgálat 1, 5 × állófázisú parazitát három különböző halálos indukálószerrel, például Hvel 1 mM 1 órán átHS-vel 10 perc 55 ° C-on, majd 1 óra inkubálás 26 ° C-on vagy miltefozinnal kezeltünk.
A parazita lizátumokat 13 x g- vel 4 ° C-on 3 percig centrifugáltuk.